依据叶绿素对可见光的吸收光谱，使用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，而后用公式核算出叶绿素含量，此法精确度高，且能在未经别离的情况下别离测出叶绿素a、b的含量。

  依据叶绿素对可见光的吸收光谱，使用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，而后用公式核算出叶绿素含量，此法精确度高，且能在未经别离的情况下别离测出叶绿素a、b的含量。

  依据朗伯－比尔规律，某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比，即：

  式中k为份额常数，当溶液浓度以分量百分浓度为单位，液层厚度为 1 厘米时，k称为该物质的比吸收系数。

  假如溶液中有数种吸光物质，则此溶液在某一波长下的总光密度等于各组分在相应波长下光密度的总和，这便是光密度的加和性。

  叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰别离坐落663 nm 和 645 nm，在波长663 nm 下，叶绿素a、b的80％丙酮溶液的比吸收系数别离为82.04和9.27，在波长645nm下别离为16.75和45.6，可据此列出下列关系式：

  式中的D663和D645为叶绿素溶液在波长663nm和645nm时的消光度，Ca和Cb别离为叶绿素a和b的浓度，以毫克/升为单位。

  称取新鲜叶片0.5克，剪碎置研钵中，加少数碳酸钙和石英砂，并参加2-3 ml  80％丙酮，研成匀浆，再参加10 ml  80％丙酮，持续研磨充沛，用一层加丙酮湿润过的滤纸过滤，再用少数丙酮将滤纸和研钵上的色素冲刷洁净，定容至25 ml 容量瓶中，摇匀。

  汲取叶绿素丙酮提取液2 ml ，加80%丙酮2 ml 稀释后，倒入1 cm 比色杯中，用分光光度计别离在波长645nm、663nm和652nm下测定光密度，以80％丙酮为空白对照。

  按公式（3）、（4）、（6）别离核算叶绿素a、b浓度及总浓度（毫克/升）